胰島素樣生長因子-II(標(biāo)準(zhǔn)品)

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-04

簡要描述：

NIBSC 96/538 胰島素樣生長因子-II(標(biāo)準(zhǔn)品)其中含有經(jīng)國際合作研究分析的大腸桿菌細(xì)胞衍生的胰島素樣生長因子-II (IGF-II)，并被確定為第一個(gè) WHO 胰島素樣生長參考試劑世界衛(wèi)生組織生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會的 Factor-II (1,2)。

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世界衛(wèi)生組織參考試劑

胰島素樣生長因子-II（人，重組）

NIBSC 96/538

酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法：破碎細(xì)胞同上，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細(xì)胞，將裂解物鋪于乙醇上，然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態(tài)）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鐘，然后離心后取上清，可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備：先用NaOH作用20分鐘，再加HCI中和，離心后取上清，含少量DNA。

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